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病毒轉(zhuǎn)染實驗有何注意事項？
2023-09-14
病毒轉(zhuǎn)染是指將外源病毒導入真核細胞的技術(shù)，用病毒將帶有目的基因的載體整合到細胞的基因組中，以達到長期穩(wěn)定表達目的基因的目的。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。那么病毒轉(zhuǎn)染實驗有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、病毒安全性問題病毒本身具有一定的危險性，需要在符合生物安全實驗室標準的條件下進行實驗，并遵守相關(guān)的實驗室安全操作規(guī)范。病毒操作時最好使用生物安全柜。如果使用普通超凈工作臺操作病毒，請不要打開排風扇。病毒操作時...
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如何提高電轉(zhuǎn)效率？
2023-09-14
電轉(zhuǎn)，也稱電穿孔法，是通過脈沖電流在細胞膜上打孔，將外源分子（DNA、RNA、mRNA等）導入真核細胞內(nèi)，來改變細胞的特性，從而達到改造細胞的目的，是實現(xiàn)細胞基因功能和蛋白質(zhì)表達研究的重要工具。那么該如何提高電轉(zhuǎn)效率呢？讓我們一起來看看吧！一、細胞收集時：1)在消化貼壁細胞時，一定要注意終止胰酶反應，防止過度消化；最好使用專業(yè)的胰酶中和劑；2)在進行細胞離心時，使用低轉(zhuǎn)速長時間離心，提升細胞的存活率；3)選擇合適狀態(tài)的細胞，一般原代細胞可以傳1-2次后使用；盡量挑選迭代次數(shù)少...
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貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么？
2023-09-13
細胞培養(yǎng)有兩種基本方式，一種是人工基質(zhì)上的單層細胞（貼壁培養(yǎng)），另一種是在培養(yǎng)基中自由漂?。☉腋∨囵B(yǎng)）。那么你知道貼壁細胞培養(yǎng)和懸浮細胞培養(yǎng)的區(qū)別是什么嗎？讓我們一起來看看吧！來自脊椎動物的大多數(shù)細胞，除了造血細胞系和少數(shù)其他細胞系，都是貼壁依賴性的，必須在經(jīng)過專門處理以允許細胞粘附和擴散的合適基質(zhì)上培養(yǎng)。然而，許多細胞系也適用于懸浮培養(yǎng)。同樣，大多數(shù)市售昆蟲細胞系在貼壁培養(yǎng)或懸浮培養(yǎng)中生長良好。懸浮培養(yǎng)的細胞可以保存在未經(jīng)組織培養(yǎng)處理的培養(yǎng)瓶中，但隨著培養(yǎng)體積與表面積的增加...
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什么是原代細胞培養(yǎng)和細胞生長曲線？
2023-09-13
你知道什么是原代細胞培養(yǎng)，和細胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的首ci培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短，遺傳性狀和體內(nèi)細胞相似，適于做細胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。最chang用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。二、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細...
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熒光定量PCR的原理是什么？
2023-09-12
熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應體系中加入熒光基團，通過對擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！以探針法熒光定量PCR為例：PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。開始時，探針完整地結(jié)合在DNA任意一條單鏈上，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收，檢測不到熒光信號...
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細胞傳代的實驗步驟是什么？有何注意事項？
2023-09-12
在細胞培養(yǎng)過程中，去除原培養(yǎng)基并將細胞從原培養(yǎng)體系轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基中，維持細胞的活力與增殖。細胞傳代既可以擴大細胞培養(yǎng)量，也能夠避免細胞因進入平臺期而出現(xiàn)生長抑制甚至死亡的情況。那么你知道細胞傳代的實驗步驟是什么嗎？有何注意事項呢？讓我們一起來看看吧！一、實驗步驟1.貼壁細胞的傳代:1)倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)及密度，評估細胞的狀態(tài)，以作為傳代比例的參考。2)提前紫外殺菌（至少30min為宜）操作臺及實驗材料。3)注意無菌操作，在操作臺中吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)舊培養(yǎng)液（盡可能去...
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如何選擇蛋白表達系統(tǒng)？
2023-09-11
在蛋白表達系統(tǒng)的相關(guān)研究中，從頭合成蛋白質(zhì)并不是一個可行的選擇。因此需要借助活細胞或細胞器用作生產(chǎn)和構(gòu)建蛋白質(zhì)的工廠。那么你知道該如何選擇蛋白表達系統(tǒng)嗎？讓我們一起來看看吧！目前，較為主流的表達宿主有大腸桿菌（E.coli）、畢赤酵母（P.pastoris）、昆蟲-桿狀病毒（Bac-to-Bac系統(tǒng)）以及哺乳動物細胞系（CHO、HEK293）等。一、細菌優(yōu)點：1.遺傳背景清楚；2.繁殖快、成本低、抗污染能力強；3.表達量高、表達產(chǎn)物分離純化相對簡單、穩(wěn)定性好；4.商品化的載體...
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你知道胎牛血清的用途和應用領(lǐng)域嗎？
2023-09-11
胎牛血清是從胎牛臍帶血中提取的一種生物制品。它是一種黃褐色液體，主要由蛋白質(zhì)、氨基酸、碳水化合物、脂類、礦物質(zhì)和生長因子等組成。那么你知道胎牛血清的用途和應用領(lǐng)域嗎？讓我們一起來看看吧！一、細胞和組織培養(yǎng)：胎牛血清是常用的培養(yǎng)基補充物之一，提供細胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)、生長因子和調(diào)節(jié)因子。它能夠維持細胞的適宜環(huán)境，促進細胞的增殖和分化，并提高細胞產(chǎn)量和特定細胞類型的功能。二、疫苗和生物制品生產(chǎn)：胎牛血清在疫苗、抗體和生物藥物的生產(chǎn)過程中起著重要的作用。它可以作為培養(yǎng)基的補充物，...
服務熱線：022-66387942
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