在單細(xì)胞測序、原代細(xì)胞培養(yǎng)等高精度實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞碎片污染是導(dǎo)致數(shù)據(jù)偏差的核心風(fēng)險(xiǎn)。百奧益康通用細(xì)胞碎片去除試劑盒（貨號(hào)BA3304），通過密度梯度離心-選擇性裂解技術(shù)，可在20分鐘內(nèi)清除樣本中90%以上的細(xì)胞碎片與雜質(zhì)，為下游實(shí)驗(yàn)提供高純度細(xì)胞懸液。
 

　　一、技術(shù)原理：雙機(jī)制協(xié)同凈化
 

　　1.溫和裂解：DRS緩沖液選擇性裂解破損細(xì)胞，釋放的DNA碎片形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)包裹雜質(zhì)
 

　　2.密度分層：通過3000×g梯度離心，形成三層結(jié)構(gòu)：
 

　　上層：含細(xì)胞碎片與蛋白聚集體
 

　　中層：網(wǎng)狀DNA-雜質(zhì)復(fù)合物
 

　　底層：完整目標(biāo)細(xì)胞
 

　　3. 精準(zhǔn)去除：移除上中兩層，保留底層高活力細(xì)胞(活性損失<5%)
 

　　二、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程（25分鐘完成）
 

　　1.樣本預(yù)處理
 

　　將細(xì)胞懸液經(jīng)300×g離心5分鐘，用3.1 mL含5% FBS的PBS重懸
 

　　2.DRS緩沖液處理
 

　　加入900 μL DRS緩沖液，輕柔吹打混勻10次，避免渦旋振蕩
 

　　3.梯度離心分層
 

　　沿管壁緩慢加入4 mL PBS覆蓋液層，3000×g水平離心20分鐘(啟用離心機(jī)緩升緩降模式)
 

　　4.碎片層去除
 

　　分層后依次吸?。?br /> 

　　? 上層4 mL PBS
 

　　? 中層DRS-碎片復(fù)合物
 

　　保留底層細(xì)胞沉淀
 

　　5.細(xì)胞回收
 

　　用含5% FBS的PBS重懸細(xì)胞，經(jīng)20 μm濾網(wǎng)過濾，即獲高純度懸液
 

　　三、性能驗(yàn)證數(shù)據(jù)
 

　　· 碎片清除率：92.3% ± 4.1%(流式細(xì)胞術(shù)檢測)
 

　　· 細(xì)胞回收率：85%以上(與初始活細(xì)胞數(shù)正相關(guān))
 

　　· 活性保持：處理前后細(xì)胞活性差異<3%(臺(tái)盼藍(lán)檢測)
 

　　· 兼容性驗(yàn)證：適用于PBMC、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞、干細(xì)胞等多種樣本
 

　　四、三大應(yīng)用場景突破
 

　　1.單細(xì)胞測序前處理：
 

　　◎ 碎片殘留率<5%，滿足10X Genomics Chromium系統(tǒng)建庫要求
 

　　◎ 有效提mRNA捕獲效率(較未處理組提升30%)
 

　　2. 原代細(xì)胞培養(yǎng)：
 

　　◎ 去除凋亡細(xì)胞碎片，將原代成纖維細(xì)胞增殖速度提升2倍
 

　　◎ 降低支原體污染風(fēng)險(xiǎn)(碎片攜帶微生物減少80%)
 

　　3. 流式細(xì)胞分選：
 

　　◎ 前向散射/側(cè)向散射圖背景信號(hào)降低至處理前的1/4
 

　　◎ 提高罕見細(xì)胞亞群檢測靈敏度(如循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢出限達(dá)0.01%)
 

　　選擇BA3304的四大優(yōu)勢：
 

　　? 廣譜適用：兼容人/小鼠/大鼠等哺乳動(dòng)物細(xì)胞
 

　　? 極簡操作：無需特殊設(shè)備，標(biāo)準(zhǔn)離心機(jī)即可完成
 

　　? 成本可控：單次處理成本僅為流式分選的1/10
 

　　? 靈活拓展：可搭配BA3311紅細(xì)胞裂解液同步去除非核細(xì)胞
 

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